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qPCR實驗熔解曲線出現多峰淺析
日期:2023-03-23 19:23
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摘要:
qPCR實驗熔解曲線出現多峰淺析:
1、非特異性擴增。
2、引物設計不佳:避免二聚體和發夾結構的出現。
3、 引物濃度不佳:適當調整引物濃度。
4、 退火溫度低:提高退火溫度。
5、 模板中有基因組DNA的污染:RNA提取過程中避免基因組DNA的污染(DNaseI處理),或通過設計引物避免非特異性擴增。
qPCR實驗熔解曲線出現多峰淺析:
1、非特異性擴增。2、引物設計不佳:避免二聚體和發夾結構的出現。
3、 引物濃度不佳:適當調整引物濃度。
4、 退火溫度低:提高退火溫度。
5、 模板中有基因組DNA的污染:RNA提取過程中避免基因組DNA的污染(DNaseI處理),或通過設計引物避免非特異性擴增。